Doc2All.ru

Москва – 2010 Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Российский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор Р.Т. Тогузов Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Д.Б. Сапрыгин доктор медицинских наук, профессор В.Б. Хватов Академик РАМН, доктор медицинских наук, профессор Л.Ф. Панченко Ведущее учреждение: ГУ НИИ «ИНСТИТУТ ПИТАНИЯ» РАМН

Защита состоится «_24»_декабря _2010г. в 14 часов на заседании диссертационного совета Д. 212.203.13 при Российском Университете Дружбы народов по адресу: 117 198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д.8, Медицинский факультет С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Российского Университета Дружбы народов по адресу: 117198, г. Москва, ул., МиклухМаклая д.6 Автореферат разослан «____» _____________2010г. Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук, профессор Лукашева Е.В.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность исследования

Новейшие исследования последних лет доказывают, что система протеолиза рассматривается, как особая форма биологического контроля, занимающая центральное место в реализации многочисленных биохимических процессов [Ahrens D.,1997; Borgono C.A.,2004; Nishikaku A.S.,2009; Scherer S., 2010]. Протеиназы, являющиеся основными участниками системы протеолиза, выполняют огромное количество разнообразных функций и контролируют практически все стороны биологических процессов, протекающих на молекулярном, клеточном, тканевом и органном уровнях [Chow A.K,2007]. Нарушение протеолитических механизмов сопровождается нерегулируемым расщеплением функционально важных белков, повреждением основных систем защиты организма, «гиперпротеолизом» и формированием патологических состояний [Яровая Г.А., 2000; Butler G.S., 2009; FrontecillCamps J.C., 2009]. Реакциям протеолиза принадлежит ключевая роль в регуляции внутриклеточного обмена белков, процессах транслокации внутри и вне клетки, образовании ферментов, гормонов и других биологически активных веществ [Соловьева Н.И.,1998]. Протеиназы присутствуют во всех без исключения клетках, внеклеточном матриксе и различных биологических жидкостях организма. В клетках они локализованы в эндоплазматическом ретикулуме, плазматических мембранах, митохондриях, цитоплазме, экстрацеллюлярном матриксе и т.д. [Яровая Г.А.,2001].

Согласно общепринятой классификации протеиназы, по механизму катализируемой реакции, делятся на четыре семейства: сериновые, цистеиновые (тиоловые, сульфгидрильные), аспартатные (карбоксильные), матриксные металлопротеиназы (ММП) [Rawlings N.D.,1997; Barrett A.J.,1997]. К настоящему времени известно 28 представителей семейства ММП, для условного обозначения, которых даются числовые названия, начиная от ММП-1 и до ММП-28 [Creemers E.J.,2001;Laurie S.,2003]. На основании данных структурной организации и субстратной специфичности в семействе ММП выделены 4 подсемейства: коллагеназы, желатиназы, стромелизины и неклассифицированные ММП (включая мембранного типа) [Woessner J.F.,1991].

Семейство ММП рассматривается в качестве одних из основных действующих ферментов системы протеолиза, участвующих в различных патогенетических вариантах воспаления, сердечно-сосудистых заболеваниях, инфекционных, аутоиммунных и аллергических реакций, злокачественной трансформации клеток [Nagase H.,1997; Adamson I.Y., 2003; Jin Won Huh M.D., 2008; McKeown S., 2009; Nanni S., 2007; Tchetverikov I., 2003; Mohammed F.F.,2003].

ММП, благодаря специфике доменных структур и особенностям функциональных возможностей, воздействуют непосредственно на экстрацеллюлярный матрикс (ЕСМ) и его составляющие [Яровая Г.А., 2002;Butler G.S.,2009]. Наши знания относительно роли ММП в развитии воспаления при остром коронарном синдроме (ОКС), внебольничной пневмонии (ВБП) и ревматоидном артрита (РА), быстро расширяются, однако механизм действия и степень их участия в деструкции и ремоделировании соединительной ткани в значительной степени остается малоизученной [Kim H.E.,2000; Webb C.S.,2006; Ohtsuka T.,2007; Baraldo S. P., 2007; Sugiyama E.,2007; Radisky D.C., 2008].

Воспаление, лежащее в основе большинства патологических процессов, представляет собой сложную реакцию организма, развивающуюся в ответ на повреждающее действие патогенных факторов. С одной стороны, в ходе воспаления происходит максимально быстрая мобилизация биохимических и иммунологических реакций. С другой – при высокой вирулентности возбудителя, а также наличии факторов риска (генетических, иммунологических, экологических), воспалительный процесс становится одной из основных причин патологических изменений в органах и тканях [Белова Л.А.,1997; Насонов Е.Л., 1999; Литвицкий П.Ф., 2002].

Заболеваемость ОКС, ВБП и РА, давно переросла медицинские рамки и стала общегосударственной задачей, что подтверждается высокими показателями заболеваемости, большими трудовыми потерями в результате временной нетрудоспособности, ранней инвалидизации и смертности населения. Согласно статистическим материалам Департамента развития медицинской помощи и курортного дела ФГУ «Центральный научнисследовательский институт организации и информатизации здравоохранения» Росздрава, заболеваемость в 2008 году на 100 000 населения России составила: пневмонии – 444.4 (в 2007 – 439,5), острый инфаркт миокарда, стенокардия – 169,8 (в 2007–166,1), ревматоидный артрит – 25,6 (в 2007 – 28,4).

пациентов с острым коронарным синдромом.

пациентов с внебольничной пневмонией.

крови пациентов с ревматоидным артритом.

синдромом, внебольничной пневмонией и ревматоидным артритом.

ревматоидным артритом.

синдромом, внебольничной пневмонией и ревматоидным артритом.

Впервые по результатам проведенной комплексной оценки показателей активности системы протеолиза, в частности, ММП-3, ММП-7, ММП-9 в сыворотке крови пациентов с острым коронарным синдромом, внебольничной пневмонией и ревматоидным артритом, выявлен факт увеличения активности протеиназ, определены их особенности при различных патогенетических вариантах воспаления.

Впервые показана степень снижения уровня ингибитора альфа макроглобулина, в зависимости от активности ММП-3, ММП-7, ММП-9. Установлена взаимосвязь активности матриксных металлопротеиназ с универсальным ингибитором альфа 2-макроглобулином.

Впервые одномоментно исследован спектр макри микроэлементов в сыворотке крови пациентов с острым коронарным синдромом, внебольничной пневмонией и ревматоидным артритом. Показана зависимость концентрации макро-микроэлементов от активности матриксных металлопротеиназ ММП-3, ММП-7, ММП-9 в исследуемых группах больных.

Впервые установлена диагностическая значимость активности матриксных металлопротеиназ ММП-3, ММП-7, ММП-9 при различных патогенетических вариантах воспаления, и определена их взаимосвязь с иммуно-биохимическими показателями сыворотки крови.

Результаты проведенных исследований позволили установить факт увеличения активности ММП-3, ММП-7 и ММП-9 в сыворотке крови больных с острым коронарным синдромом, внебольничной пневмонией и ревматоидным артритом. Охарактеризованы специфичные изменения ММП, связанные с различными патогенетическими вариантами воспаления: увеличение активности ММП-3 при ревматоидном артрите, активности ММП-7 при внебольничной пневмонии и активности ММП-9 при остром коронарном синдроме. Установлено, что активность ММП-9 может быть использована в качестве дифференциально-диагностического маркера при остром коронарном синдроме. Выявлены особенности содержания в сыворотке крови (снижение уровня) универсального ингибитора протеиназ альфа2-макроглобулина, установлена взаимосвязь между степенью снижения концентрации ингибитора и патогенетическим вариантом воспаления (максимальное снижение при ревматоидном артрите, минимальное при остром коронарном синдроме). Установлено изменение спектра макрмикроэлементов и их взаимосвязь с активностью протеиназ при различных патогенетических вариантах воспаления: увеличение содержания кобальта, железа, меди, снижение концентрации магния и цинка, и относительная стабильность ионизированного кальция.

Материалы и отдельные положения диссертации доложены на ІІ-ом международном конгрессе «Эндоэкологическая медицина» (2002г., гг. Москва-Халкидики), ІІ-ой всероссийской научной конференции «Актуальные вопросы функциональной межполушарной ассимметрии» (2003г., г. Москва), на Всероссийских конференциях «Школа по клинической лабораторной диагностике» ФМБА России (2006г.,2008г., г. Москва), научнпрактическом симпозиуме «Ключевые проблемы совершенствования лабораторного обеспечения медицинской помощи» (2007г., г. Москва), X-ом Всероссийском конгрессе «Лабораторные технологии при организации медицинской помощи» (2010г., г. Москва). Результаты диссертационной работы используются в качестве лекционного материала для курсантов и ординаторов кафедры клинической лабораторной диагностики ФУВ ВПО РГМУ, ФГОУ ИПК ФМБА России (2006-2010гг).

Определение активности матриксных металлопротеиназ ММП-3, ММ7, ММП-9 системы протеолиза и универсального ингибитора альфа макроглобулина внедрены в работу клинико-диагностических лабораторий ФГУЗ КБ №83 и ФГУЗ КБ №85 ФМБА России.

Работа выполнена в государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Российский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» и Федеральном государственном учреждении здравоохранения клинической больнице № 83 Федерального медикбиологического агентства (главный врач – доктор медицинских наук, профессор Кузовлев О.П.). Клиническая характеристика больных.

В исследование включено 509 пациентов, находившихся на стационарном лечении в кардиологическом, пульмонологическом и ревматологическом отделениях клинической больницы №83 ФМБА России.

В соответствии с поставленными целями и задачами сформированы 3 группы пациентов: первая – представлена кардиологическими больными с ОКС, вторая – пульмонологическими больными с диагнозом: ВБП и третья группа – ревматологическими больными с диагнозом: РА. Группа кардиологических больных включает 188 пациентов с ОКС, из них: с ОИМ 59 (31,4%) и НС 129 (68,6%). Средний возраст группы с ОКС составляет 51,7±14,6 лет. ОКС установлен в соответствии с рекомендациями Рабочей группы Европейского Кардиологического Общества, руководства Американской коллегии кардиологов и Ассоциации сердца [Eur. Heart. J. 2000; JACC. 2000]. Неоднородность клинических состояний у пациентов с ОКС положена в основу формирования групп с ОИМ и НС:

• Группа пациентов с ОИМ включает 59 человек, средний возраст, которых составляет 50,3±13,4 лет. Крупноочаговый инфаркт миокарда выявлен у 30 (51,0%) человек, мелкоочаговый у 29 (49,0%). Сердечная недостаточность установлена у 36 (61,0%) пациентов, осложненный вариант ОИМ, в основном протекающий с тахикардией в состоянии покоя выявлен у 12 (20,3%) человек.

• Группа с НС представлена 129 пациентами средний возраст, которых составляет 53,0±15,8 лет. Степень тяжести по Braunwald Е. (1989) составляла ІІА-ІІІА.

Согласно критериям включения/исключения в кардиологическую группу не вошли пациенты с постинфарктным кардиосклерозом, повторными инфарктами миокарда, хронической сердечной недостаточностью, стабильной стенокардией, нарушениями ритма и тяжёлыми сопутствующими заболеваниями. Группа пульмонологических больных представлена 186 пациентами средний возраст, которых составляет 46,4±12,5 лет, в возрасте от 34 до 59 лет. Диагноз ВБП установлен на основании клинических данных и комплексного обследования (рентгенологического в 2-х проекциях, компьютерной томографии, лабораторного - общего и биохимического анализа крови, а также клинического и бактериологического исследования мокроты).

При проведении культурального исследования мокроты у 93 (50,0%) из 186 человек, выделены следующие этиологически значимые возбудители: у 29 (31,2%) человек Streptococcus pneumoniae, 17 (18,3%) Moraxella (Branchamella catarrhalis), 12 (13,3%) Haemophilus influenzae, 10 (11,3%) Staphylococcus aureus, 8 (8,9%) Streptococcus pyogenes, 6 (7,1%) Enterobacter spp., 4 (4,5%) Pseudomonas aeruginosa, 3 (3,4%) E. сoli, 1 (1,0%) Klebsiella pneumoniae, 1 (1,0%) Candida albicans с концентрацией более 107 КОЕ/мл.

Одним из критериев назначения антибактериальной терапии при внебольничной пневмонии, является тяжесть течения заболевания, которая усиливается на фоне ранее предшествующих бронхолегочных заболеваний, что положено в основу формирования 2 групп пациентов:

• Группа пульмонологических больных с диагнозом - внебольничная пневмония без предшествующих бронхолегочных заболеваний (ВБП ББЛЗ), представлена 119 (64,0%) пациентами, средний возраст, которых составляет 47,4±12,9 лет. При культуральном исследовании мокроты у 41 (34,5%) пациента выделены следующие этиологически значимые бактериальные агенты: у 10 (24,4%) человек Streptococcus pneumoniae, 6 (14,6%) Moraxella (Branchamella catarrhalis), 6 (14,6%) Haemophilus influenzae, 6 (14,6%) Staphylococcus aureus, 5 (12,2%) Enterobacter spр., 4 (9,8%) Streptococcus pyogenes, 2 (4,9%) Pseudomonas aeruginosa, 2 (4,9%) E. Сoli. Обращает на себя внимание обилие выявленной Candida albicans у 11 пациентов, однако её концентрация составляла менее 104 КОЕ/мл.

• Группа пульмонологических больных с диагнозом внебольничная пневмония на фоне ранее предшествующих бронхолегочных заболеваний (ВБП ФБЛЗ) (острый бронхит, хронический бронхит, пневмония) представлена 67 (36,0%) пациентами, средний возраст, которых составляет 45,3±12,1 лет. При культуральном исследовании мокроты у 50 (74,6%) пациентов выделены следующие этиологически значимые микроорганизмы: у 19 (38,0%) больных Streptococcus pneumoniae, 11 (22,0%) Moraxella (Branchamella cataralis), 6 (12,0%) Haemophilus influenzae, 4 (8,0%) Staphylococcus aureus, 4 (8,0%) Streptococcus pyogenes, 2 (4,0%) Pseudomonas aeruginosa, 1 (2,0%) Klebsiella pneumoniae, 1 (2,0%) Enterobacter spр., 1 (2,0%) E. Сoli, 1 (2,0%) Candida albicans концентрация более 107 КОЕ/мл.

Согласно критериям включения/исключения в пульмонологическую группу не вошли пациенты с пневмониями вирусной этиологии и вызванными специфическими возбудителями, а также с тяжёлыми сопутствующими заболеваниями. Группа ревматологических больных представлена 135 пациентами с диагнозом - РА с внесуставными проявлениями, II-ІV-ой стадией заболевания, с низкой DAS28<3,2 (8,3%), умеренной 3,2>DAS28<5,1 (71,9%) и высокой активностью заболевания DAS28>5,1 (19,8%). Степень активности рассчитывалась согласно критериям Европейской противоревматической лиги (DAS28) [Smolen J.S., 2003]. Диагноз РА установлен в соответствии с классификационными критериями, предложенными Американской Ревматологической Ассоциацией [Arnett F.C.,1988], клиническое обследование пациентов проводили по стандартам, рекомендованным Ассоциацией ревматологов России [Насонова В.А.,2005, 2007].

В исследование включены 135 пациентов с диагнозом РА, средний возраст, которых составляет 49,0±13,0 лет в возрасте от 36 до 62 лет. Длительность заболевания составила от 2,5 до 16 лет, ревматоидный фактор (РФ) выявлен у 67 (49,7%) больных. Клиническая картина сопровождалась наличием ревматоидных узелков у 40 (29,7%) пациентов, периферической лимфоаденопатией у 33 (24,4%), поражением мышц (атрофия, амиотрофия, периферическая нейромиопатия) у 27 (20,0%), ревматоидного васкулита у 13 (9,6%), поражением почек (интерстициальный нефрит, мембранозный гломерулонефрит) у 9 (6,6%), наличием анемии у 6 (4,4%), поражением глаз (склерит, эписклерит) у 3 (2,2%), сердца (выпотной перикардит, миокардит) у 3 (2,3%), легких (сухой плеврит) у 1 (0,8%) пациента. По степени активности пациенты распределились следующим образом - с низкой DAS28<3,2 (10,8%), умеренной 3,2>DAS28<5,1 (69,6%) и высокой активностью DAS28>5,1 (19,6%).

Наличие РФ характеризующего тяжесть и прогноз РА, а также значительная частота возникновения у лиц женского пола, положены в основу формирования 4-х групп пациентов:

• Группа больных РА РФ (+) представлена 67 пациентами, средний возраст, которых составляет 47,7±12,5 лет. Клиническая картина сопровождалась наличием ревматоидных узелков у 23 (34,4%) пациентов, поражением мышц (атрофия, амиотрофия, периферическая нейромиопатия), наличием периферической лимфоаденопатии у 10 (14,9%), поражением почек (интерстициальный нефрит, мембранозный гломерулонефрит) у 9 (13,4%), ревматоидным васкулитом у 9 (13,4%), наличием анемии у 2 (3,0%), поражением сердца (выпотной перикардит, миокардит) у 3 (4,5%), легких (сухой плеврит) у 1 (1,5%) пациента. По степени активности пациенты распределились следующим образом - с низкой DAS28<3,2 (5,2%), умеренной 3,2>DAS28<5,1 (64,0%) и высокой активностью DAS28>5,1 (30,8%).

• Группа больных РА РФ (-) представлена 68 пациентами средний возраст, которых составляет 48,9±12,4 лет. Клиническая картина сопровождалась наличием периферической лимфоаденопатии у 25 (36,7%), поражением мышц (атрофия, амиотрофия, периферическая нейромиопатия) у 17 (25,1%) пациентов, наличием ревматоидных узелков у 15 (22,0%), ревматоидного васкулита у 4 (5,9%), анемии у 4 (5,9%), поражением глаз (склерит) у 3 (4,4%) пациентов. По степени активности пациенты распределились следующим образом - с низкой DAS28<3,2 (11,8%), умеренной 3,2>DAS28<5,1 (79,4%) и высокой активностью DAS28>5,1 (8,8%).

• Группа женщин больных РА, представлена 93 пациентками, средний возраст которых составляет 47,5±13,5 лет. Клиническая картина сопровождалась, наличием ревматоидных узелков у 31 (33,3%), периферической лимфоаденопатии у 26 (27,9%), поражением мышц (атрофия, амиотрофия, периферическая нейромиопатия) у 18 (19,4%), наличием ревматоидного васкулита у 5 (5,4%), анемии у 6 (6,5%), поражением почек (интерстициальный нефрит, мембранозный гломерулонефрит) у 4 (4,3), глаз (склерит, эписклерит) у 3 (3,2%). По степени активности пациенты распределились следующим образом - с низкой DAS28<3,2 (16,3%), умеренной 3,2>DAS28<5,1 (74,0%) и высокой активностью DAS28>5,1 (9,7%).

• Группа мужчин больных РА, в неё включены 42 пациента, средний возраст которых составляет 53,5±15,5. Клиническая картина сопровождалась поражением мышц (атрофия, амиотрофия, периферическая нейромиопатия) у 9 (21,4%) больных, наличием ревматоидных узелков у 9 (21,4%), ревматоидного васкулита у 8 (19,0%), периферической лимфоаденопатии у 7 (16,7%), поражением почек (интерстициальный нефрит, мембранозный гломерулонефрит) у 5 (11,9%), сердца (выпотной перикардит, миокардит) у 3 (7,2%), легких (сухой плеврит) у 1 (2,4%) пациента. По степени активности пациенты распределились следующим образом - с низкой DAS28<3,2 (9,9%), умеренной 3,2>DAS28<5,1 (61,0%) и высокой активностью DAS28>5,1 (29,1%).

Согласно критериям включения/исключения в исследование не включены больные с суставным синдромом, а также особыми клиническими формами РА (синдром Фелти, болезнь Стилла) и тяжёлыми сопутствующими заболеваниями. Группа здоровых лиц.

С целью изучения диагностического и прогностического значения семейства ММП, в данном исследовании выполнено комплексное определение активности ММП-3, ММП-7, ММП-9 в сыворотке крови пациентов с различными патогенетическими вариантами воспаления, где модель метаболического воспаления рассматривалась на примере ОКС, бактериального – ВБП и аутоиммунного – РА. Можно видеть (рис.1), что в сыворотке крови больных ОКС активность ММП-3 на 31,6% выше (p<0,05), больных с ВБП на 21,1% выше (p<0,05), больных РА в 2,2 раза выше (p<0,05), чем в сыворотке крови здоровых лиц.

здоровых и больных с ОКС, ВБП, РА, ng/ml.

Максимальная активность ММП-3 выявлена в сыворотке крови больных РА, при аутоиммунном варианте воспаления. Анализируя активность ММП-3, в сыворотке крови больных РА, женщин больных РА, мужчин больных РА, больных РА РФ(+), больных РА РФ(-), установлено значительное её увеличение в 2,3 раза (p<0,05) в группе мужчин больных РА и больных РА РФ (+), по сравнению с группой контроля. Особенностью подсемейства стромелизинов, в том числе и ММП-3, является их способность разрушать широкий спектр компонентов ЕСМ, включая протеогликаны, ламинин, фибронектин и некоторые типы коллагена [Nagase H.,1997]. Поэтому высокая активность ММП-3, в сыворотке крови данных групп больных, предполагает максимально выраженную деструкцию ЕСМ, существенное напряжение процессов катаболизма с последующей реорганизацией структуры соединительной ткани. Последние исследования промоуторной области гена ММП-3 позволили выявить, что частота внесуставных проявлений РА, встречается у лиц гомозиготных по 5 аллели и доказывают связь между полиморфизмом гена ММП-3 и особенностью клинического течения РА [Scherer S., 2010]. Следует отметить, что работ, отражающих характер корреляционной связи активности ММП-3 и РФ очень мало, и носят противоречивый характер. В проведенном исследовании нами отмечается наличие прямой корреляционной связи активности ММП-3 с РФ и совпадает с результатами одних исследователей [Klimiuk P.A.,2002]. Однако не совпадают с показателями другого исследования, в котором отсутствует наличие корреляционной связи между РФ и активностью ММ3, ММП-8, ММП-9 [Tchetverikov I.,2003].

Всё возрастающие промышленные загрязнения, влияющие на экологическую обстановку, представляют собой серьёзную проблему клинической и профилактической медицины. В целом ответ дыхательных путей на инфекцию представляет собой каскад событий, включающий активацию синтеза провоспалительных цитокинов, усиленную миграцию полиморфноядерных нейтрофилов и активную выработку протеиназ. У практически здоровых лиц, проживающих в промышленных зонах, где воздушное загрязнение окружающей среды характеризуется высоким содержанием реактивных форм кислорода (ROS) и аэрозолей тяжелых металлов отмечается увеличение активности ММП-2, ММП-7, ММП-9 [Su W.Y.,2000]. В проведенном исследовании активность ММП-7 (рис.1) в сыворотке крови больных ОКС на 9,1 % выше (p>0,05), ВБП в 1,9 раза выше (p<0,05), больных РА на 13,6% выше (p<0,05), чем в группе здоровых лиц. Следует отметить, что незначительное увеличение активности ММП-7 отмечается и в здоровых эпителиальных клетках легочной ткани и, вероятно, является следствием влияния на дыхательную систему промышленных, геохимических и микробных загрязнений окружающей среды. Функция, выполняемая ММП-7 в здоровой легочной ткани, пока не изучена, предполагается, что она участвует в сохранении клеточного гомеостаза здорового эпителия и деградации продуктов апоптоза [Dunsmore S.E.,1998; Zuo F., 2002].

и больных ВБП ФБЛЗ и ВБП ББЛЗ, ng/ml.

Одним из критериев назначения антибактериальной терапии при внебольничной пневмонии является тяжесть заболевания, которая может усиливаться на фоне ранее предшествовавших бронхолегочных заболеваний, что было положено в основу формирования 2-х групп пульмонологических больных: первая представлена больными с ВБП ББЛЗ, вторая - больными с ВБП ФБЛЗ.

Активность ММП-7 (рис.2) в сыворотке крови больных с ВБП ББЛЗ в 1,8 раза выше (p<0,05), а ВБП ФБЛЗ в 2,1 раза выше (p<0,05), по сравнению с группой контроля. Дыхательная система является основным местом контакта организма с инфекционными агентами, при этом отмечается чрезвычайная чувствительность эпителиальных клеток к бактериям. Высокая активность ММП-7 в сыворотке крови пульмонологических больных может быть объяснена рядом причин: во-первых, у больных ВБП ФБЛЗ отмечается более разнообразная этиологически значимая флора (Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Moraxella (Branchamella cataralis), Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae), во-вторых, она определяется в значительно большем количестве, чем при ВБП ББЛЗ. Культуральное исследование мокроты в группе больных с ВБП ББЛЗ позволило выявить этиологически значимые бактериальные агенты в 36,1% случаев, в то время как в группе больных с ВБП ФБЛЗ в 74,6%. В тоже время, следует отметить специфические особенности микрофлоры, которые связаны с наличием определенных факторов вирулентности или особым характером реагирования защитных систем организма на тот или иной вид возбудителя. В-третьих, необходимо подчеркнуть, что активация ММП-7 в эпителиальных клетках в ответ на бактериальное воздействие представляет собой регулируемый процесс, физиологически направленный на удаление патологического агента, и который сопровождается ускоренным образованием высоких уровней ММП-7 [Parks W.C.,2001]. Влияние бактериального агента (Staphylococcus aureus) на поверхность эпителиальных клеток, в первые часы от начала заболевания, сопровождается значительным увеличением нейтрофилов, потерей альвеолярной структуры и увеличением коагуляционных белков [Ventura C.L., 2008]. Бактериальные факторы не только регулируют активность ММП-7, но и оказывают своё влияние на направление распространения очага воспаления и формирование «дорожки воспаления» [Wilson C.L.,1999].

В тоже время увеличение активности ММП-7 может рассматриваться и как один из защитных механизмов против бактериальной инфекции. Эпителиальные клетки в ответ на повышение активности ММП-7 увеличивают производство «молекул защиты» с антимикробными свойствами, которые являются первой линией защиты против бактериальных агентов. Следует отметить, что «молекулы защиты» могут воздействовать как на грамположительные, так и грамотрицательные бактерии. Вероятно, данные процессы особенно активно протекают в группе больных с ВБП ФБЛЗ, где спектр этиологически значимой микрофлоры представлен более широко. Поскольку не доказано прямого действия ММП-7 на бактерии, то высказывается предположение о её участии в регуляции деятельности «молекул защиты», а также перемещении клеток, участвующих в деструкции ЕСМ соединительной ткани. Однако следует подчеркнуть, что дефицит ММП-7 усиливает деятельность бактерий [L?pez-Boado Y.S.,2000].

Особенно активно ответная реакция дыхательных путей формируется при нарушении в системе протеазы/антипротеазы, что приводит к разрушению нормальной архитектоники легочной ткани, и в отдельных случаях ведет к развитию фиброза. Исследования последних лет отмечают увеличение активности ММП-7 при различных формах пневмонии, идиопатическом лёгочном фиброзе, хронической обструктивной болезни лёгких и других заболеваниях бронхолегочной системы, а не только на ранних этапах развития фиброза как предполагалось ранее. Поэтому высокую активность ММП-7 предлагается рассматривать не как маркер, свидетельствующий о развитии фиброза, а только как показатель предшествующий развитию фиброза [Vuorinen K.,2007] или как предлагают другие исследователи в качестве «регулятора» активности развития легочного фиброза [Jin Won Huh M.D., 2008]. Вместе с тем, результаты экспериментальных исследований указывают на то, что высокая активность ММП-7 связана с полиморфизмом генов [Studer S.M., 2007]. Согласно генетическим исследованиям активность ММП-7 рассматривается в качестве посредника развития легочного фиброза, а сами исследования могут быть положены в основу идентификации наличия фиброза при легочных заболеваниях [Zuo F., 2007].

Исследования последнего десятилетия демонстрируют широкий интерес к изучению активности ММП-9 в сыворотке и плазме крови при сердечнсосудистой патологии [Kalela A.,2002; Thrailkill K.,2006; Fukuda D,2006; Garvin P.,2008]. Однако значительное количество работ, посвященных изучению роли ММП в патогенезе атеросклероза и ИБС, в основном носят экспериментальный характер. Клинических исследований, связанных с определением активности ММП в системном кровотоке у пациентов с ИБС и ОКС, немного. В результате (рис.1) проведенного исследования выявлено достоверное увеличение активности ММП-9 у пациентов с различными патогенетическими вариантами воспалительного процесса - ОКС, ВБП и РА на 69,6%, на 23,1% и на 35,5% соответственно, по сравнению с контрольной группой. Известно, что ММП-9 вырабатывается активизированными макрофагами и гранулоцитами [Nagase H.,1992], а также базофилами, нейтрофилами, гладкомышечными и эндотелиальными клетками, которые под действием провоспалительных цитокинов TNF-? и IL-1 начинают активно её секретировать.

больных с ОКС, ОИМ и НС, ng/ml.

Максимальное (рис.3) увеличение активности ММП-9 выявлено в сыворотке крови кардиологических больных и характеризуется различной степенью активности в зависимости от клинических вариантов ОКС. Так, в сыворотке крови больных ОКС, активность ММП-9 на 69,6% выше (р<0,05), ОИМ на 95,8% выше (р<0,05), а НС на 48,2% выше (р<0,05), чем результаты её активности в контрольной группе.

Страницы: 1 2 3

Авторефераты, диссертации, научные работы

Публикации 11.10.2010

Другие разделы

АКТИВНОСТЬ МАТРИКСНЫХ МЕТАЛЛОПРОТЕИНАЗ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ПАТОГЕНЕТИЧЕСКИХ ВАРИАНТАХ ВОСПАЛЕНИЯ